
LC MS/MS sisteminde bir karışımdaki maddeler yüksek performanslı sıvı kromatografisi sayesinde fizikokimyasal özelliklerine göre ayrılarak, kütle dedektörü ile kalitatif ve kantitatif olarak analiz edilmektedir.
Normalde yüklü halde olmayan moleküller, kütle spektrometreleri iyonizasyon işlemi ile yüklü iyonize moleküller haline dönüştürürler. Yüksek hassasiyette seçici filtre özelliği gösteren ve “Quadrupol” olarak adlandırılan filtrelerden cihazda iki adet bulunmaktadır. Birinci quadrupol filtrede m/z (kütle/yük) oranına göre ayrılan moleküller, Collision Cell adı verilen parçalanma hücresinde yüksek saflıkta azot gazına çarptırılarak parçalanmaya tabi tutulmaktadır. Oluşan fragmentler ikinci quadrupol filtreye girerler. İkinci quadrupol filtrede parçalanma sonucu oluşan iyonların üzerinden teşhis ve miktar tayini yapılır. Aynı m/z oranına sahip pek çok molekülün mevcut olmasına karşın aynı parçalanma iyonlarına sahip molekül sayısı doğada 1/10000 dür.
Mevcut İyonlaştırma Başlıkları : ESI / APCI
Kütle Tarama Aralığı (m/z) : 20-2000
Kolonlu Enjeksiyon: Mevcut kolon türüne göre en fazla 60 dak lık metod
MRM geçiş hızı: saniyede 555 MRM’ye kadar
Dwell süresi: 0.8 msn
Pozitif-negatif iyonizasyon geçiş süresi: 15 msn
Tarama hızı: 15.000 u/sn (maks)
LC-MS/MS çok düşük konsantrasyonlarda maddenin miktar tayininin yapılabilmesini mümkün kılmaktadır. Ölçüm hassasiyeti, µL örnek hacimlerinde ng, pg düzeyinde bir duyarlılığa sahiptir.
1) Fenolik Madde Analizi: Metanol ile hazırlanmış ekstraktlarda 23 fenolik bileşiğin analizi yapılmaktadır.
Analiz Edilen Maddeler | İyonizasyon Tür | İyonizasyon Mod |
4-HBA (4-hydroxybenzoic acid) | ESI | neg |
4-hydoxybenzaldehyde | poz | |
Caffeicacid | neg | |
Catechin | poz | |
Chlorogenicacid | neg | |
Chicoricacid | neg | |
Coumarin | poz | |
Epicatechin | poz | |
Fumaricacid | neg | |
Gallicacid | neg | |
Gentisicacid | neg | |
Hesperidin | neg | |
Naringenin | neg | |
p-coumaricacid | neg | |
Protocatechuicacid | neg | |
Protocatechuicacidethyl ester | neg | |
Quercetin | neg | |
Quercetin-3-glucoside | neg | |
Resveratrol | poz | |
Rutin | poz | |
Salicylicacid | neg | |
Tannicacid | neg | |
Vannilicacid | neg |
Tarım: Yetiştirilen ürünlerde ilaç kalıntısı tespiti
Çevre: Su ve toprak ürünlerinde pestisit analizi
Gıda, Kimya, Biyoloji: Biyolojik aktiviteleri ölçülen bitki, meyve ekstaktlarının ve arı ürünlerinin (bal, propolis, polen, arı sütü vb) ve gıdaların içeriğindeki fenolik bileşiklerin ve farklı metabolitlerin kalitatif/kantitatif tespiti.
Moleküler Araştırmalar: Proteomik çalışmalarda protein tespiti
Tıp, Veterinerlik: Serum, plazma, idrar ve BOS gibi çeşitli numunelerde hormon ve metabolitlerin (aminoasit, karbohidrat, ilaç vb) kalitatif/kantitatif tespiti.
1) Karakaş, Ö., Yılmaz, M.A., Asan, H.S, Onay, A. ve Çalar N. (2017). Contents of phenolic and flavonoid compounds in Isatis demiriziana Mısırdalı: an endemic to the Southeast Anatolia, Turkey. Biological Diversity and Conservation, 10/1, 115-123.